摘 要

对美国剑麻(Agave ameicana L.)不定芽丛进行不同浓度NAA和6-BA两种激素固体培养，培养10d后，观察分化情况，找出快繁美国剑麻的最佳激素配方。向培养基中添加100mmol/L、200mmol/L、300mmol/L NaCl,研究盐处理对龙舌兰不定芽丛生长、4种保护酶、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢含量的影响。结果表明：低浓度NAA搭配较高浓度的6-BA是最适合美国剑麻不定芽再生的激素处理,即配方MS NAA 0.125mg/l 6-BA 3.75mg/l MES 0.25g 谷氨酸0.2g 泛酸钙 1ml。在盐胁迫下，NaCl短时间之内对POD、SOD和APX活性的促进作用都比较明显，MDA活性小幅提升。短时间的NaCl处理也能增加材料细胞中的CAT活性、可溶性蛋白和H₂O₂的含量，而长时间的高浓度NaCl处理后，CAT活性、溶性蛋白和H₂O₂的含量较之短期的提升又会有所下降。由相对电导率和生长量可以看出，随着盐胁迫程度的加强，材料细胞的细胞膜受损越来越严重，生长受阻甚至倒退。

关键词：美国剑麻；盐胁迫；组织培养；生理指标

Study on Adventitious Shoot Regeneration and Salt-tolerance of Agave americana L.

ABSTRACT

Induction of adventitious buds in Agave Americana was studied by adding different concentrations of NAA and 6-BA into solid culture. The resistances to NaCl stress and drought in clusters of adventitious buds were also investigated by adding 0,100,200,300mmol/L NaCl into medium . The activities of peroxidase (POD) , superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) and ascorbic acid enzyme (APX) , and the content of malondialdehyde (MDA),soluble protein and H₂O₂ were measured in clusters of adventitious buds of agave under salt treatment. The results show that: with higher concentrations of low concentrations of NAA 6-BA is the most suitable for the Agave americana processing of adventitious shoot regeneration hormone that formula MS NAA 0.125mg / l 6- BA 3.75mg / l MES 0.25g glutamyl acid 0.2g calcium pantothenate 1ml. Under salt stress, NaCl within a short time of POD, promoting the role of SOD and APX are more obvious, MDA activity slightly improved. NaCl treatment can also increase short CAT activity in the cell material, the content of soluble protein and H₂O₂, and after a long period of high concentrations of NaCl treatment, CAT activity and soluble protein content of H₂O₂ and short-term improvement than would have decline. As can be seen from the relative conductivity and growth, with the degree of salt stress enhanced cell membrane material and more serious damage, stunted or even backwards.

Key words：Agave americana；Salt stress；Tissue Culture；adventitious buds

目 录

1.前言 1

1.1 研究目的 1

1.2 展望 1

2.材料与方法 2

2.1 材料来源 2

2.2 激素处理 2

2.3 盐胁迫处理 2

2.4 POD活性测定 3

2.5 SOD活性测定 3

2.6 CAT活性测定 3

2.7 MDA活性测定 3

2.8 APX活性测定 3

2.9 蛋白含量测定 4

2.10 脯氨酸含量的测定 4

2.11 过氧化氢含量的测定 4

2.12 电导率的测定 4

2.13 生长量的测定 5

2.14 数据处理与分析 5

3.结果与分析 6

3.1 不定芽再生情况 6

3.2 盐处理对不定芽丛POD活性的影响 7

3.3 盐处理对不定芽丛SOD活性的影响 7

3.4 盐处理对不定芽丛MDA活性的影响 8

3.5 盐处理对不定芽丛CAT活性的影响 9

3.6 盐处理对不定芽丛APX活性的影响 10

3.7 盐处理对不定芽丛可溶性蛋白含量的影响 10

3.8 盐处理对不定芽丛脯氨酸含量的影响 11

3.9 盐处理对不定芽丛过氧化氢含量的影响 12

3.10 盐处理对不定芽丛电导率的影响 12

3.11 盐处理对不定芽丛生长量的影响 13

结 论 15

参考文献 17

1.前言

1.1 研究目的

能源是现代社会赖以生存和发展的基础，安全、可靠的能源供应和高效、清洁的能源利用是实现经济可持续发展的基本保证，也是国家战略安全保障的基础之一。当代人类文明的发展模式建立在以化石燃料利用为核心的工业化基础上，然而目前正在开发利用的主要化石能源都已濒临枯竭。同时，大量消耗化石能源排放的SO₂和CO₂严重威胁到人类赖以生存的生态环境，造成全球气候变暖、酸雨等灾难性后果。能源植物以其资源的丰富性、可再生性和各种污染物零排放等优势势必将成为一种重要的替代能源。

1.2 展望