摘 要

：为探讨东方百合杂交后代与亲本间的亲缘关系,本研究选用了46对SRAP (sequence- related amplified polymorphism)标记引物对东方百合 ‘Constanta’和‘Sorbonne’以及30份‘Constanta’ × ‘Sorbonne’的F₁代基因组DNA进行遗传多样性以及遗传关系分析。共检测到140个多态性标记位点，平均每对引物组合产生3.1个多态性位点，其中不同引物组合扩展条带大小集中在100到1100bp之间。应用NTSYS-PC (Version 2.1)软件采用平均距离法(UPGMA)进行聚类分析。结果表明，‘Constanta’和‘Sorbonne’以及其杂交子代间的相关系数为0.480~0.672，其中‘Sorbonne’和8号供试材料的亲缘关系最近。UPGMA 聚类将32个供试材料分成2类，较好的反应了其亲缘关系。聚类分析结果与形态分类结果大致吻合。SRAP标记适合于百合属植物遗传多样性与遗传关系分析。本研究为百合杂交后代真实性鉴定提供了DNA分子证据，从而提高选育效率，降低育种成本。

关键词:东方百合;杂交后代;SRAP;遗传关系Genetic diversity of Oriental lily hybrid offspring using SRAP markers

Abstract：To probe the hybrids and their parents relationship of oriental lily, 45 sequence-related amplified polymorphism (SRAP) primer combinations were chosen to analyze genetic diversity of ‘Constanta’ and ‘Sorbonne’ and 33 F₁ hybrids of ‘Constanta’ × ‘Sorbonne’. 140 polymorphism loci were produced and the average number of polymorphic loci were 3.1per primer pairs.Primer combinations of different bands in 100 on size expanded to 1100bp. Dendrograms were constructed by the unweighted pair group method of arithmetic average (UPGMA) using the NTSYS-PC version 2.1. The result showed the genetic similarity coefficient of ‘Constanta’ and ‘Sorbonne’ and 30 F₁ hybrids of ‘Constanta’ × ‘Sorbonne’ ranged from 0.480 to 0.672.Among them ‘Sorbonne’ dan 8 of the material’s closest relative. 32 materials were classified into 2 clustering groups by UPGMA, The result quite shows their linage relationship. Clustering analysis results and the shape classification results roughly identical. SRAP mark suitable for the lily family genetic diversity and genetic relationship analysis.This research will provid evidence of DNA molecules for identification of lily hybrids, improve breeding efficiency and reduce the cost of breeding.

Key words: Oriental Lily; Hybrid; SRAP; Genetic Relationship

目 录

前言 1

1文献综述 2

1.1遗传标记及其应用 2

1.1.1形态标记 2

1.1.2细胞标记 2

1.1.3生化标记 2

1.1.4分子标记 2

1.2常用分子表及类型 3

1.2.1限制性片段长度多态性（RFLP） 3

1.2.2随机扩增多态性DNA（RAPD） 3

1.2.3简单重复序列（SSR） 4

1.2.4扩增片段长度多态性（AFLP） 4

1.2.5简单重复序列间扩增多态性（ISSR） 4

1.2.6序列相关扩增性（SRAP） 4

1.3常用分子标记RFLP、RAPD、SSR、AFLP、ISSR、SRAP 5

1.4 DNA分子标记在花卉研究中的应用及进展 6

1.4.1种质资源鉴定 6

1.4.2遗传多样性研究 6

1.4.3亲缘关系及分类研究 6

1.5花卉分子育种中应注意的问题 7

2 材料与方法 7

2.1实验材料 7

2.2试验方法 8

2.2.1 基因组DNA提取 8

2.2.2 PCR体系及扩增 8

2.2.3数据统计 8

3结果与分析 9

3.1 SRAP扩增结果及多态性条带分析 9

3.2遗传多样性分析 9

4讨论与展望 10

致谢 12

参考文献 13

前言

百合(Lilium.L.)是百合科（Liliaceae）百合属(Lilium)植物所有种的总称，为多年生草本球根花卉^[1]。百合是世界五大鲜切花之一，其花朵硕大、花色艳丽、花姿百态、芳香宜人，被世界各地广为栽培，在世界鲜切花市场中占有十分重要的地位。目前，荷兰和美国成为世界百合的培育中心，已培育出数以千计的品种，几乎垄断了国际百合种球市场。我国的百合鲜切花生产，种球几乎完全依赖进口，进口的种球种性退化快，严重制约着我国百合鲜切花产业化的发展。

中国是百合属植物自然分布中心，全世界百合约有97个种，而起源于我国的就有47个种和18个变种，约占世界百合属植物的一半，其中有36个种和15个变种为中国特有种^[2]。中国的百合种质源于18世纪后期开始相继传入欧洲，对世界百合育种做出了极大的贡献。中国百合资源不仅是我国的宝贵财富，也是世界花卉种质资源库中的宝贵财富^[3]。利用我国丰富的百合资源，采用生物技术与常规育种相结合，培育出拥有自主知识产权的百合新品种，这对改变我国在百合产业上依赖进口品种的被动局面，提高我国花卉业在国际市场种的竞争力，具有十分重要的意义。

针对以上问题，我国早在20世纪80年代初，黄济明就率先进行百合的杂交育种工作，90年代以来，杂交育种研究持续不断，当时的杂交以野生百合间的杂交为主，后因工作中断，并没有培育出有市场潜力的品种^[4]。近年来，随着国内百合市场的持续升温，从事百合育种的科研院所也在增多。目前，在百合资源收集和种质创新方面开展工作较多的单位主要包括北京农科院、北京林业大学、南京林业大学、西北农林科技大学、云南省农科院等，但在百合育种的基础理论方面的研究则相对较少。