摘 要

关键字：草莓，多酚氧化酶，褐变，丙酮粉

Strawberry polyphenol oxidase extraction, purification and enzymology character study

Abstract: Enzymatic browning is the strawberry pulp processing and storage of important issues, Polyphenol oxidase (PPO) is a cause of enzymatic browning important enzymes. To freeze acetone making strawberry polyphenol oxidase acetone powder, with spectrophotometry research pH, temperature, inhibitors on enzyme activity effect. The results show that the optimal role was 6.4; pH Enzyme inactivation follow level 70 ℃ half-life dynamics is 2.4 min; SO₂, homocysteine, vitamin C is a strong inhibitor.

Keywords: strawberry, polyphenol oxidase, browning, acetone powder.

目录

前言 1

第一章 文献综述 2

1.1 草莓及草莓多酚氧化酶研究进展 2

1.2 多酚氧化酶在其它果疏中的研究进展 3

1.2.1 植物中的多酚氧化酶及作用 3

1.2.1.1 菊芋多酚氧化酶 4

1.2.1.2 烟草多酚氧化酶 4

1.2.1.3 荔枝多酚氧化酶 4

1.2.1.4 植物PPO的研究现状及展望 5

1.2.2 微生物中的多酚氧化酶的作用及发展 5

1.2.2.1 微生物漆酶 5

1.2.2.2 微生物酪氨酸酶 6

1.2.2.3 微生物多酚氧化酶的研究现状及展望 6

1.3 多酚氧化酶的提取方法及活性测定 6

1.4 多酚氧化酶的应用 7

第二章 草莓多酚氧化酶的初提取 9

2.1 材料和方法 9

2.1.1 材料与试剂 9

2.1.2 PPO提取 9

2.1.3 柱色谱分离 9

2.1.4 SDS-PAGE电泳 9

2.1.5 酶活力和蛋白质含量测定 10

2.1.6 热稳定性和pH值影响活性的试验 10

2.2 多酚氧化酶的分离和纯化 10

2.3 结论 12

第三章 草莓多酚氧化酶酶学性质的研究 13

3.1 草莓多酚氧化酶的影响因素 13

3.1.1 pH对PPO活性的影响 13

3.1.2 温度对PPO活性的影响 13

3.1.3 抑制剂对PPO活性的影响 13

3.2 结果与讨论 13

3.2.1 pH对PPO活性的影响 13

3.2.2 PPO的热稳定性 13

3.2.3 抑制剂对 PPO 活力的影响 14

3.3 结论 15

全文结论 16

致谢 17

参考文献： 18

前言

草莓又叫红莓、洋莓、地莓等，是一种红色的水果。草莓是对蔷薇科草莓属植物的通称，属多年生草本植物。草莓的外观呈心形，鲜美红嫩，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香。草莓营养价值高，含丰富维生素C ，有帮助消化的功效，与此同时，草莓还可以巩固齿龈，清新口气，润泽喉部。

多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）是自然界中分布极广的一种金属蛋白酶，普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中，甚至在土壤中腐烂的植物残渣上都可以检测到多酚氧化酶的活性。由于其检测方便，是被最早研究的几类酶之一。 多酚氧化酶的共同特征是能够通过分子氧氧化酚或多酚形成对应的醌。在广义上，多酚氧化酶可分为三大类：单酚单氧化酶(酪氨酸酶tyrosinase,EC.1.14.18.1)、双酚氧化酶(儿茶酚氧化酶catechol oxidse,EC.1.10.3.2)和漆酶(laccase,EC.1.10.3.1)。在这三大类多酚氧化酶中，儿茶酚酶主要分布在植物中，微生物中的多酚氧化酶主要包括漆酶和酪氨酸酶。现在大部分文献所说的多酚氧化酶一般是儿茶酚氧化酶和漆酶的统称。

草莓多酚氧化酶是引起草莓酶促褐变的主要酶类，PPO催化草莓中的内源性多酚物质氧化生成黑色素，严重影响制品的营养，风味及外观质量。这些情况对生产者与消费者均是不希望看到的。

草莓多酚氧化酶含量的控制能够使草莓得到更长的贮藏时间，更高的草莓质量，同时可以推动草莓的深加工产业，带来更高的产品附加值。

第一章 文献综述

1.1 草莓及草莓多酚氧化酶研究进展

草莓又叫红莓、洋莓、地莓等，是一种红色的水果。草莓是对蔷薇科草莓属植物的通称，属多年生草本植物。草莓的外观呈心形，鲜美红嫩，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香。草莓营养价值高，含丰富维生素C ，有帮助消化的功效，与此同时，草莓还可以巩固齿龈，清新口气，润泽喉部。 随着综合价值的进一步开发利用，草莓已成为我国许多地区农业增效、农民增收的主要途径。因此，发展草莓产业，开发出更多草莓深加工产品有着非常实际而又重要的意义。

草莓适合种植在阳光充足，疏水性好的土壤里。土壤深度大约在8－10英寸。大棵型的草莓，行距要在12英寸，株距约在18英寸为好。要及时摘除植株的藤蔓，以利于草莓的结果。草莓的产量有周期性，所以最好在种植的头几年培植一些新植株。如果不喜欢管理草莓，就可以每隔18－24英寸种一棵草莓，这样草莓就可以随处蔓生。当然会显得有些零乱，草莓也不大。如果想避免这种情况，可以适当摘除一些藤蔓。在秋天，要在植株上铺上一层土，防止霜冻。等土壤上冻后，可以再在植株上铺3－4英寸厚的干草。到第二年的春天，当有新叶子长出后，再移去干草。等天气转暖，并稳定后，在移去植株表层的覆盖土壤。但要在行间留一些干草，以防止野草的生长和保持土壤的水份。

目前世界上大多数国家都有草莓栽培。美国草莓栽培面积2.3万公顷，产量56.7万吨，约占世界总产量的28%，平均产量24.6吨/公顷。日本栽培面积1.1万hm2，产量21.8万吨，占世界总产量的11%，平均产量19.3吨/公顷。欧洲是主要草莓产地，约占世界产量的50%，波兰、意大利、西班牙、荷兰、比利时、俄罗斯，罗马尼亚和英国栽培面积较大，产量一般为9.5-18.3吨/公顷。